Caractérisation des cellules souches embryonnaires et des iPSC par les marqueurs de pluripotence

Les cellules souches embyronnaires (ES) et les cellules souches pluripotentes induites (iPS) peuvent être fonctionnellement caractérisées par leur abilité à se différencier en cellules des 3 couches germinales. En plus de cette capacitéUndifferentiated embryonic stem (ES) and induced pluripotent stem (iPS) cells can be functionally characterized by the ability to differentiate into cells of the three germ layers. En plus de la capacité de donner naissance à tous les types de cellules, un certain nombre de marqueurs moléculaires ont été indentifiés pour vérifier l'état de pluripotence des cellules souches. Par exemple, les cellules souches pluripotentes expriment les protéines de surface SSEA-4 et phosphatase alcaline et des facteurs de transcription tels que Oct-3/4 et Nanog. La vérification de l'état de pluripotence des cellules souches en utilisant des marqueurs connus au début d'une expérimentation permet de s'assurer que les études de prolifération et de différenciation seront de bonne qualité.

ESC/iPSC Characterization Kit (Antibody Pluripotency Marker Kit)

Embryonic Stem Cell (ESC) / Induced Pluripotent Stem Cell (iPSC) Characterization Kit est conçu pour analyser l'état de pluripotence des cellules ES et iPSC en analysant l'expression de certains marqueurs. Les kits sont prêt-à-l'emploi et fournissent un méthode rapide et sensible pour confirmer la pluripotence des cellules ES et iPSC.

Le Pluripotency Marker Kit comprend :

  • Anticorps primaires et secondaires faciles d'utilisation pour le marquage de marqueurs de pluripotence établis
  • Réactifs de fixation, perméabilisation, blocage et montage
  • Contre-coloration de l'ADN
  • Test d'activité de la phosphatase alcaline

Marqueurs détectés par le kit :

Humain: OCT4, SOX2, SSEA4, TRA-1-60, TRA-1-81
Souris: OCT4, SOX2, SSEA1

Caractéristiques:

  • Sensibilité: des clones hiPSC partiellement différenciés peuvent être détectés
  • Facile d'utilisation: le kit prêt-à-l'emploi contient tous les tampons et solutions pour réaliser des analyses d'immunohisotchimie et d'activité enzymatique

Le Pluripotency Marker Kit contient des anticorps dirigés contre des marqueurs de pluripotence établis en format pré-dilué dans un concentration optimisée pour le marquage en immunofluorescence.

Oct4 et Sox2 sont des facteurs de transcription fortement exprimés dans les cellules ES et iPSC humaines et murines et dans les cellules embryonaires germinales. SSEA-1 est un antigène présent à la surface des cellules ES murines, mais qui n'est pas détecter dans les cellules pluripotentes humaines. SSEA4, TRA-1-60 et TRA-1-81 sont des protéines de surface spécifiques de cellules ES et iPS.

Les kits permettent également d'effectuer un test rapide et sensible de l'activité phosphatase alcaline (AP). AP est un marqueur membranaire des cellules souches et la forte expression de cette enzyme est associé à l'état de pluripotence des cellules ES et iPS.


Référence Description Cdt
ASK-3006 Human ESC/iPSC Characterization Kit 1 kit
ASK-3007 Rat ESC/iPSC Characterization Kit 1 kit
ASK-3005 Mouse ESC/iPSC Characterization Kit 1 kit

 


ES/iPS Cell Pluripotency Marker RT-PCR Kit

L'étude de l'expression des gènes spécifiques des cellules souches est une méthode pour identifier les lignées de cellules souches. Le mRNA Pluripotency Marker Kit inclus les sets d'amorce permettant l'analyse de ces marqueurs.

Le kit pour souris comprend:

  • Nanog
  • Oct4
  • Sox2
  • Tbx3
  • Esrrb
  • Tcl1
  • Actin (contrôle positif)

Le kit pour humain comprend:

  • NANOG
  • OCT4
  • SOX2
  • UTF1
  • hTERT
  • ZFP42(REX1)
  • DEMT3B
  • G3PDH (contrôle positive)
Référence Description Cdt
ASK-6101 hESC/iPSC Pluripotency RT-PCR Kit (Human) 20 reactions
ASK-6001 mESC/iPSC Pluripotency RT-PCR Kit (Mouse) 20 reactions
ASK-6201 rESC/iPSC Pluripotency RT-PCR Kit (Rat) 20 reactions